产品介绍

UltrAuFoil® 金微孔薄膜载网

这种新开发的超稳定金支撑膜专为冷冻电子显微镜（cryo-EM）设计，可显著减少冷冻样品在成像过程中的移动。这提升了图像对比度与质量，从而在使用更少数据的情况下获得更优的三维重构结果。

在冷冻电镜成像过程中，传统的碳支撑膜会发生移动——尤其是在电子束照射初期。这种移动会导致图像模糊，使得小分子或结构复杂的生物大分子难以解析。

使用 UltrAuFoil®（由英国医学研究理事会分子生物学实验室（MRC LMB）的 Christopher J. Russo 博士与 Lori A. Passmore 博士设计，Quantifoil Micro Tools 公司生产），可大幅降低样品漂移。

核心优势

·         超低漂移：金的高导电性 + 热匹配设计 → 成像期间样品几乎不动；

·         高分辨潜力：特别适合小分子（<100 kDa）或柔性复合物的结构解析；

·         兼容自动化：已整合进主流 Cryo-EM 自动采集流程（如 EPU, SerialEM）。

典型应用

·         单颗粒冷冻电镜（SPA）

·         小蛋白、膜蛋白、病毒衣壳等挑战性样品

·         需要高精度对齐的电子断层扫描（Cryo-ET）

 使用注意事项

·         必须调整聚焦策略（不能依赖 Thon rings）；

·         建议新手先用标准碳膜练习，再过渡到金膜；

·         成本高于碳膜，适用于对数据质量要求极高的项目。

Q1：为什么用金（gold）制作箔膜？

答：因为金具有高导电性、不氧化、抗辐照损伤，且其表面化学惰性、生物相容性好，非常适合高分辨冷冻电镜。

碳膜在电子束下易充电、变形；而金导电性极佳，可迅速导走电荷，避免静电漂移。

金在空气中不氧化，长期稳定性优于铜或镍。

Q2：为什么金箔厚度是 500 Å（50 nm）？

答：400–500 Å 是最佳厚度——既能有效抑制样品移动（与更厚膜效果相当），又能在常规滤纸吸 blotting 条件下形成足够薄的冰层。若低于 400 Å，支撑性能会下降。

太薄 → 机械强度不足，易破裂；

太厚 → 冰层变厚，不利于高分辨成像；

50 nm 是稳定性与冰层厚度之间的最优平衡点。

Q3：为什么 TEM 载网也用金？

答：使用同种金属可消除冷却过程中因热膨胀系数不同导致的差异收缩，从而避免支撑膜几何形变或张力变化。

若金膜贴在铜网上，降温至液氮温度（–196°C）时，铜与金收缩率不同 → 膜起皱或撕裂；

全金系统（膜+网）确保热力学一致性，维持孔结构稳定。

Q4：如何储存 UltrAuFoil®？保质期多久？

答：应存放在载网盒中，置于避光、阴凉、低湿环境。虽无明确过期日，但建议两年内使用。

Q5：使用前是否需要处理？

答：无需预处理，开箱即用。但可通过标准辉光放电（glow discharge）或等离子体系统使其更亲水，也可采用其他金表面改性方法。

 注意：金本身疏水，对水溶液样品铺展不利，因此通常需做亲水化处理。

Q6：如何设置电子束进行数据采集？

答：推荐使用圆对称电子束，中心对准微孔，并覆盖孔周围一小圈金支撑区域。图像应在孔中心区域采集。

Q7：如何对 UltrAuFoil® 聚焦？

答：由于金膜为晶体结构，无非晶区，无法像碳膜那样通过 Thon rings（振荡对比度条纹）聚焦。推荐两种简单方法：

开启束倾摆动（beam tilt wobble），最小化图像位移；

移除物镜光阑，在孔边缘观察金晶格的衍射斑点，当衍射斑与金晶格图像相对位移最小时，即为焦平面。

关键点：传统碳膜靠非晶背景产生 Thon rings 聚焦，而金膜是单晶或多晶，必须用衍射或束倾法聚焦。

Q8：如何校正像散（astigmatism）？

答：建议在使用 UltrAuFoil® 前，先用标准校准样品校正像散和束倾。

Q9：支持自动化数据采集吗？

答：支持。已成功在 UltrAuFoil® 上通过束倾聚焦法实现自动化数据采集。

Q10：UltrAuFoil® 是否易碎？

答：不比传统碳膜更脆弱。但若用镊子操作不当，或在快速冷冻（plunge-freezing）过程中破裂，会严重损害其稳定性。仅建议在膜完整、均匀的网格区域采集数据。

Q11：能否在其上加一层非晶碳连续膜？

答：可以。标准的“浮膜转移法”（float transfer）可用于将薄层非晶碳转移到 UltrAuFoil® 上。

应用场景：某些对金表面吸附性差的样品（如小蛋白），可加碳膜增强附着。