问: 中性封片剂（DPX)和水溶性封片剂有何区别？免疫荧光和普通免疫组化用的一样吗？
答: 中性封片剂DPX一般为PH 7.0左右的油性物质，如中性树酯，用二甲苯调成合适浓度后用于封片，但标本要经过脱脂、脱水等处理，可用于长期保存切片等。水溶性一般为50%左右的甘油，用于短期保存染色的切片，如荧光染色。一般说来，荧光染色和一般免疫组化的封片剂无区别，但由于荧光在碱性环境中能激发更绿的光，所以，用于封荧光染色的溶剂可调PH在8-10 之间。
答: 对不同显色底物所用的封片剂也有所不同：
如辣根过氧化物酶HRP的作用底物为DAB或AEC.在DAB显色后再用苏木素或甲级绿甲基蓝复染之后，以中性封片剂封片；而AEC显色后用苏木素或甲基蓝复染，然后是以水性封片剂封片。
碱性磷酸酶AP的显色底物包括BOIB/NBT或FAST-RED等。NBT显色后复染与DAB同，也用DPX封片，而FAST-RED显色则与AEC相同，也是用水性封片剂封片。
问：DPX用量？是否等二甲苯未挥发干就封片？树胶是否常温保存？盖玻片封片前为何要加热？
答：
1 DPX为中性封固剂，用于多种染色方法匀不易褪色，但组织收缩较明显，故应尽量使其为均匀的一薄层。
2不干就封是对的，干封主要是有人怕闻二甲苯，从100%乙醇中出来不过二甲苯，干燥后再封。形态不好。
3树胶不用在冰箱保存。
4盖玻片封片前加热可防止白雾的产生。
问：在塑料培养瓶上作原位免疫组化，但是用丙酮固定后出现相似相溶，请问用什么方法固定细胞，而避免相似相溶？
答：塑料培养瓶上作原位免疫组化有几个问题：
1.固定，丙酮不行，可用酒精或甲醇，会好一些；
2.封片，不能用DPX等脂溶性封片剂（也会溶），只有用甘油等水溶性封片剂；
3.摄像，塑料培养瓶上作原位免疫组化拍摄出来的照片质量不太好，因为塑料本身透光度不好，再加上固定时又会降低塑料透光度。
推荐：使用细胞培养片，如96孔板细胞培养片等，解决以上问题。且方便操作。
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